酶聯(lián)免疫試劑盒是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用很廣的技術(shù)。聯(lián)免疫檢測試劑盒(ELISAkit)是一種快速、方便、準確的檢測樣品中靶蛋白的研究工具,被用于許多重要的研究領(lǐng)域,包括癌癥、心血管、細胞生物學、表觀遺傳學、新陳代謝、免疫學、神經(jīng)科學、信號轉(zhuǎn)導等。
其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯微量反應(yīng)板)表面,使酶標記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。
酶聯(lián)免疫試劑盒操作注意事項:
1、試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
2、實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4、使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5、使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6、洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
7、底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立
即讀取OD值。
8、加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9、按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。